Soutenance de thèse de Amine EZZARIAI

Devenir des antibiotiques lors du traitement aérobie et anaérobie des boues de STEPs pour une valorisation agronomique.


Titre anglais : The fate of antibiotics during aerobic and anaerobic treatment of WWTP sludge for an agronomic valorization.
Ecole Doctorale : SDU2E - Sciences de l'Univers, de l'Environnement et de l'Espace
Spécialité : Ecologie fonctionnelle
Etablissement : Institut National Polytechnique de Toulouse
Unité de recherche : UMR 5245 - Laboratoire écologie fonctionnelle et environnement
Direction de thèse : Eric PINELLI- Mohamed Hafidi


Cette soutenance a eu lieu samedi 15 septembre 2018 à 9h00
Adresse de la soutenance : Faculté des Sciences Semlalia, Université Cadi Ayyad, Marrakech, Maroc - salle Salles des soutenances

devant le jury composé de :
Eric PINELLI   Professeur   INP Toulouse FRANCE   Directeur de thèse
Mohamed HAFIDI   Professeur   Université Cadi Ayyad Marrakech MAROC   CoDirecteur de thèse
Christophe DAGOT   Professeur   Université de Limoge FRANCE   Rapporteur
Salah SOUABI   Professeur   FST Mohammadia MAROC   Rapporteur
Naaila OUAZZANI   Professeur   Université Cadi Ayyad Marrakech MAROC   Examinateur
Dominique PATUREAU   Directeur de Recherche   INRA Narbonne FRANCE   Examinateur


Résumé de la thèse en français :  

L’utilisation massive des antibiotiques contribue à leur accumulation dans les boues des stations d’épurations. L’application directe des boues est parmi les sources de dissémination des antibiotiques et des gènes de résistance aux antibiotiques. Le compostage et la méthanisation sont parmi les bioprocédés de traitement des boues qui permettent d’éliminer ou réduire les teneurs de certains antibiotiques. Dans ce travail, une boue primaire de la STEP de Marrakech a été contaminée par trois familles d’antibiotiques (macrolides, tétracyclines, fluoroquinolones) pour conduire 4 essais de compostage à différentes doses (dont un essai témoin) et un essai de méthanisation en mode semi-continu.
Les résultats du compostage ont montré que l’augmentation des concentrations d’antibiotiques retarde la dégradation de la matière organique et affecte le ratio C/N. De même, la phase thermophile est perturbée, retardée et réduite dans le temps. Pour la méthanisation, une concentration unique et réaliste a été testée. Dans ces conditions, aucun effet sur la production du biogaz ou sur la dégradation de la matière organique n’a été observé.
Afin de suivre la dissipation des trois familles d’antibiotiques utilisées au cours du compostage et de la méthanisation, une approche analytique basée sur l’extraction accélérée par solvant (ASE) suivie par l’application d’une méthode des ajouts dosés avant quantification par chromatographie liquide couplée à de la spectrométrie de masse en tandem (UPLC-MS/MS) a du être mise en point. Le compostage et la méthanisation permettent de réduire significativement les concentrations des molécules parents appartenant à la famille des macrolides et des tétracyclines. Par contre, l’élimination des fluoroquinolones est non-significative et ne dépasse pas 30%. Au cours du compostage, la dissipation des macrolides se fait en phase de stabilisation tandis que la phase de maturation est impliquée dans la dissipation des tétracyclines. Les concentrations en cirprofloxacine (fluoroquinolone) semblent légèrement évoluer au cours du procédé probablement en raison d’une adsorption/désorption sur le co-substrat lignocellulosique utilisé. Concernant la méthanisation, l’élimination des macrolides et des tétracyclines est significative durant la stabilisation du procédé mais n’atteinds pas les rendements observés lors du compostage.
La diminution des concnetrations des molécules parents est probablement accompagnée par une biotransformation des antibiotiques sous forme de métabolites qui à ce stade ne sont pas connus. La question de la rémanance de certaines molécules comme les fluoroquinolones, interpelle quand au risque d’antibiorésistance. Ainsi, la valorisation des composts/digestats comme amendements organiques des sols dois à terme conduire à une réflexion concernant sur la réglementation qui inclus la présence de molécule de la classe des antibiotiques.

Mots clés : Antibiotiques, Compostage, Méthanisation, ASE, LC-MS-MS

 
Résumé de la thèse en anglais:  

The intensive use of antibiotics for human purposes leads to their presence and accumulation in the sludge produced from wastewater treatment plants. The direct application of sludge is among the sources of dissemination of antibiotics and antibiotics resistance genes. Composting and anaerobic digestion are some of the most used bioprocess for sludge treatment, and which allow the removal/decrease of some antibiotics families. In this work, a primary sludge from the wastewater treatment plant of Marrakesh was spiked using 3 families of antibiotics (macrolides, tetracyclines, fluoroquinolones) to conduct (1) 4 composting experiments with various concentrations levels, and (2) an anaerobic digestion experiment in a semi-continuous mode.
Composting results showed that the organic matter degradation was delayed and the C/N ratio was affected by an increase of antibiotics concentrations. Likewise, the thermophilic stage was disturbed, the heat release was affected and the coming of the temperature maxima was delayed. In the other hand, one realistic concentration was used during the anaerobic digestion. In this condition, no effect was observed especially on the biogas production as well as the organic matter degradation.
To assess the fate of antibiotics during composting and anaerobic digestion, an analytical approach based on the accelerated solvent extraction followed by the standard addition method and the UPLC-MS/MS was developed. Composting and anaerobic digestion lead to a significant removal of parent compounds belonging to the family of macrolides and tetracyclines. In contrast, the fluoroquinolones removal is not-significant and has not exceeded 30%. During composting, the thermophilic stage was responsible on macrolides elimination. In contrast, the maturation stage was more implicated on the removal of tetracyclines. Ciprofloxacin (fluoroquinolone) showed some fluctuations in concentrations. The sorption/desorption on palm rachis could probably explain the observed behavior of this molecule during composting. During the anaerobic digestion, the removal of macrolides and tetracyclines was significant, within the stabilization, but still lower than the observed ones during composting.
The decrease of parent compounds of antibiotics is probably accompanied by a biotransformation of these compounds in unknown metabolites. The presence of recalcitrant compounds after the bioprocess could promote the development of resistant bacteria including pathogens. In the future regulations, the valorization of compost/digestate as an amendment of agricultural soil requires taking into account the presence of antibiotics.

Key words: Antibiotics, composting, anaerobic digestion, ASE, LC-MS-MS

Mots clés en français :Antibiotique, Traitement aérobie, Traitement anaérobie, Boues de STEPs, Valorisation agronomique, Devenir,
Mots clés en anglais :   Antibiotics, Aerobic treatment, Anaerobic treatment, WWTP, Agronomic valorization, Fate,